иммуноэлектрофорез используется для лабораторно-диагностического обнаружения моноклональных антител в крови пациента. Моноклональные антитела происходят из одной клетки и направлены против одних и тех же антигенов. По этой причине они должны быть оценены как патологические и, в случае подтверждения, свидетельствовать о таких заболеваниях, как болезнь Вальденстрема.
Что такое иммуноэлектрофорез?
Иммуноэлектрофорез используется для лабораторного диагностического обнаружения моноклональных антител в крови пациента.Ионы обладают разной подвижностью. Эта различная мобильность составляет основу процедуры электрофореза. Эти методы отделяют разные вещества друг от друга с помощью электрических полей и силы тяжести. Хорошо известным методом в этой области является иммуноэлектроферез.
Это качественный метод диагностики, который используется для выявления моноклональных антител. Антитела - это иммунологически активные белковые вещества из определенной клеточной линии. Все моноклональные антитела основаны на одних и тех же В-лимфоцитах и поэтому направлены против одного эпитопа. Каждый естественный иммунный ответ на вторгающиеся антигены соответствует поликлональному ответу и, следовательно, направлен против различных эпитопов. Таким образом, моноклональный иммунный ответ указывает на патологические процессы в организме.
Моноклональные антитела связывают разные молекулы с высокой специфичностью. Это связывание можно продемонстрировать с помощью иммуноэлектрофореза. Процедура является качественной процедурой лабораторной диагностики и состоит из двух типов процедур: электрофореза сыворотки и иммунодиффузии.
Функция, эффект и цели
Иммуноэлектрофорез сочетает в себе методологию электрофореза сыворотки с иммунодиффузией. Сыворотка пациента наносится на пленку из агарозного геля или ацетата целлюлозы. Также применяется контрольная сыворотка. После нанесения следует электрофоретическое разделение образцов. Между разделительными линиями наносят антисыворотку, IgG, IgA, IgM, уксусную кислоту для нормального электрофореза и каппа и лямбда.
Это вызывает реакцию с антителами в сыворотке пациента, в результате чего образуются линии преципитации. В зависимости от используемой антисыворотки и положения и формы отдельных линий можно сделать выводы об иммуноглобулинах, содержащихся с легкими цепями каппа или лямбда. В случае лямбда-полосы есть свободные легкие цепи, состоящие из антител. Лаборатория предоставляет дополнительные доказательства с помощью редких IgE и IgD, что позволяет точно определить иммуноглобулины. Метод иммунодиффузионного электрофореза проводится по Пьеру Грабару и Кертису Уильямсу и соответствует комбинации электрофореза белков в агарозном геле и диффузии антител.
Сначала проводят электрофорез в агарозном геле. Впоследствии содержащиеся антитела диффундируют против полос антигенов и, таким образом, создают дуги преципитата. Это следует отличать от ракетного иммуноэлектрофореза по Лауреллу, который соответствует электрофорезу белков в агарозном геле, каждый из которых содержит антитела в определенной концентрации. В геле есть слегка щелочной буфер, который позволяет только антигенам мигрировать и который заставляет большинство антител достигать изоэлектрической точки за счет воздействия слегка щелочного значения pH до тех пор, пока они не перестанут двигаться электрофоретически.
В начале ракетного иммуноэлектрофореза наблюдается избыток антигена, так что образуются растворимые комплексы антиген-антитело. Во время электрофореза также происходит связывание антигенов с другими антителами. Таким образом, в точке эквивалентности образуются иммунопреципитаты, которые напоминают ракетоподобные фигуры с высотой, пропорциональной концентрации антигена. Для оценки теста измеряют высоту осадка.
Здесь вы можете найти свое лекарство
➔ Лекарства для укрепления защиты и иммунной системыРиски, побочные эффекты и опасности
Обнаружение моноклональных антител имеет особое значение для диагностики множественной миеломы и болезни Вальденстрема. Представленные доказательства говорят о злокачественном перерождении иммунных клеток. Множественная миелома соответствует раку костного мозга, который характеризуется злокачественным размножением продуцирующих антитела клеток в плазме.
Эти плазматические клетки продуцируют антитела и их фрагменты. Злокачественные плазматические клетки всегда происходят из общей клетки-предшественника и поэтому генетически идентичны. Они производят только моноклональные антитела. Злокачественное новообразование этого заболевания может соответствовать предраковой стадии, но также может достигать очень злокачественной стадии, которая без лечения быстро заканчивается летальным исходом. Симптомы заболевания возникают в результате злокачественного роста клеток или антител и фрагментов антител. Наиболее частые симптомы включают боль в костях, растворение костей и спонтанные переломы.
Уровень кальция в крови часто повышен. Кроме того, аномальные антитела часто откладываются в тканях и вызывают функциональные нарушения в органах, которые могут привести к таким симптомам, как почечная недостаточность или нарушение кровотока. Болезнь Вальдстрема также относится к злокачественным опухолям. Точнее, это злокачественная лимфома, относящаяся к медленно прогрессирующим и почти бессимптомным В-клеточным неходжкинским лимфомам. В большинстве случаев аномальная продукция моноклонального IgM из-за активности клеток злокачественной лимфомы может быть обнаружена при заболевании.
Болезнь Вальденстрема по своим свойствам чрезвычайно похожа на множественную миелому, но обычно имеет более благоприятное течение. К моменту постановки диагноза у большинства пациентов с болезнью Вальденстрема симптомы отсутствуют. У других пациентов на ранней стадии проявляются симптомы, такие как неспецифическая усталость или периферические невропатии, которые вызваны отложением моноклональных IgM в миелиновой оболочке. Даже небольшое количество IgM может вызвать полинейропатию. У других пациентов полинейропатия не возникает даже на высоких уровнях. Кроме того, могут возникать неспецифические симптомы, такие как жар, нежелательная потеря веса или ночная потливость. Боль в костях тоже характерна.
Из-за перепроизводства IgM кровь становится гипервязкой, поэтому упомянутые симптомы могут быть связаны с синдромом гипервязкости. В большинстве случаев эта склонность к кровотечениям проявляется в частых носовых кровотечениях, головных болях, общем недомогании или нечеткости зрения и жалобах на слух. Для выявления злокачественных заболеваний этого типа иммуноэлектроферез давно стал стандартной диагностической процедурой.